产品货号:
MT0019
中文名称:
一步法高保真RT-PCR MasterMix
英文名称:
5×One-Step HiFi RT-PCR Mix
产品规格:
250T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本品采用稳定高效的一步法RT-PCR预混体系,以RNA为模板,使用基因特异性反向引物进行反转录反应,获得第一链cDNA,随后使用基因特异性正向引物和反向引物进行PCR扩增,在同一反应体系中一步完成从反转录到PCR的全部过程。扩增产物可直接点样进行电泳检测。5×One-Step HiFi RT-PCR Mix包含了从反转录到PCR的全部试剂组分,包括:耐热M-MLV反转录酶、Rnase Inhibitor、化学修饰的高保真DNA聚合酶、dNTP、绿色Loading染料。其PCR扩增用酶为高保真酶,可轻松扩增2kb以下基因产物,扩增产物除正常电泳检测外,还可连接入平端克隆载体,或直接进行PCR产物测序,确保基因序列的高保真扩增。
特点:
1.55℃进行反转录的MLV反转录酶,能更好的转录含有复杂高级结构的RNA模板。
2.高效便捷的反转录预混体系。
3.高保真扩增。
产品组成:
储存:请置于-20℃,可保存3年。
使用方法:
1.按以下组分配制反应液:
注意:过多的RNA 模板量会抑制 PCR 反应,通常模板量需要优化。
2.在PCR 仪上按以下条件进行 RT-PCR 反应:
3.PCR反应结束后,直接进行电泳检测。预混液中已经包含绿色染料,无需再加入DNA Loading Buffer。
相关搜索:一步法高保真RT-PCR MasterMix,5×One-Step HiFi RT-PCR Mix
特点:
1.55℃进行反转录的MLV反转录酶,能更好的转录含有复杂高级结构的RNA模板。
2.高效便捷的反转录预混体系。
3.高保真扩增。
产品组成:
组分 | 250T | 5000T |
5×One-Step HiFi RT-PCR Mix | 1ml | 20ml |
储存:请置于-20℃,可保存3年。
使用方法:
1.按以下组分配制反应液:
加入物 | 加入量 |
RNA(病毒DNA/RNA样品直接使用2~10μl) | 5-500 ng |
5×One-Step HiFi RT-PCR Mix | 4μl |
基因特异性上游引物(10μM) | 0.8μl |
基因特异性下游引物(10μM) | 0.8μl |
RNase-Free H2O | Up to 20μl |
注意:过多的RNA 模板量会抑制 PCR 反应,通常模板量需要优化。
2.在PCR 仪上按以下条件进行 RT-PCR 反应:
温度 | 时间 | 说明 |
50℃ | 10分钟 | 反转录反应 |
95℃ | 15分钟 | 失活MLV,并激活DNA聚合酶 |
95℃ | 20s | 35~40 循环 |
Tm值 | 20s | |
72℃ | 2Kb/min | |
72℃ | 2分钟 | 末端延伸 |
3.PCR反应结束后,直接进行电泳检测。预混液中已经包含绿色染料,无需再加入DNA Loading Buffer。
相关搜索:一步法高保真RT-PCR MasterMix,5×One-Step HiFi RT-PCR Mix